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液相色譜是實驗室最爲常見的分(fēn)析儀器，但是大(dà)家對它的認知(zhī)卻是各相徑庭。究其根本，使用液相色譜是用來分(fēn)離(lí)複雜(zá)樣品加以鑒定。所以，分(fēn)離(lí)能力才是評判一(yī)套液相色譜優劣的标準。影響分(fēn)離(lí)能力的因素有很多，本期内容我(wǒ)們先從液相色譜的發展史來審視我(wǒ)們到底需要什麽樣的液相色譜。

色譜的理論基礎源自1903年俄國植物(wù)化學家茨維特（Tswett）在分(fēn)離(lí)植物(wù)中(zhōng)的色素中(zhōng)首次提出的“色譜法”（Chromotography）和“色譜圖”（Chromatogram）的概念。然而受制造技術和理論發展緩慢(màn)的影響，之後液相色譜一(yī)度沉寂，沒有大(dà)步發展。1938年，庫恩獲得了諾貝爾化學獎，其采用色譜法對胡蘿蔔素進行分(fēn)離(lí)，使得色譜法名聲大(dà)振，迅速爲各國科學家關注并采用。

上世紀60年代，随着氣相色譜理論和實踐發展，以及機械、光學、電子等技術上的進步，液相色譜又(yòu)開(kāi)始活躍。科克蘭（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯（Horvath）、莆黑斯、裏普斯克等人把高壓泵和化學鍵合固定相用于液相色譜，開(kāi)發了世界上第一(yī)台高效液相色譜儀。1963年，沃特世公司推出了世界上第一(yī)台商(shāng)品化的高壓液相色譜儀GPC-100，開(kāi)創了液相色譜的時代。

GPC-100原型機

上世紀70年代中(zhōng)期以後，微處理機技術用于液相色譜，進一(yī)步提高了儀器的自動化水平和分(fēn)析精度。1972年，沃特世公司推出用于HPLC系統的M6000高壓泵。這款可精準控制流體(tǐ)的6000 psi高壓泵的推出是HPLC技術史上的裏程碑，使得HPLC儀器在全球範圍内的實驗室中(zhōng)推廣開(kāi)來。

此前，HPLC 是High Pressure Liquid Chromatography的縮寫，即高壓液相色譜。随着M6000高壓泵、U6K高壓進樣系統和µBondapak單官能團鍵合矽膠顆粒色譜柱的問世，沃特世改寫了原有HPLC中(zhōng)“P”的意義，從此，HPLC重新定義爲High Performance Liquid Chromatography，即高效液相色譜。

随着液相技術的不斷發展，與液相色譜儀息息相關的色譜柱，也從最初的無定形顆粒，發展到全多孔顆粒，大(dà)大(dà)增強了分(fēn)離(lí)效能。

80年代中(zhōng)期，高效液相分(fēn)析技術已經漸趨成熟，計算機技術也開(kāi)始在高效液相中(zhōng)使用。與此同時色譜填料技術也在迅速發展，色譜柱的顆粒度逐步從10 μm向5 μm過渡。90年代後期， 5 μm填料顆粒色譜柱将傳統HPLC的效能發揮到最佳，色譜柱填料也從單一(yī)的矽膠鍵合相變得更加多樣，增強了色譜系統的選擇性。

2000年初，沃特世研發出更小(xiǎo)粒徑亞2 μm顆粒度的色譜柱，與5 μm色譜柱相比，它可以幫助色譜工(gōng)作者帶來更好的分(fēn)離(lí)效果。然而常規的液相産品較大(dà)的擴散體(tǐ)積無法将亞2 μm色譜柱的性能優勢體(tǐ)現出來，因此沃特世公司推出了超高效液相系統（UPLC，Ultra Performance Liquid Chromatography），重新定義了分(fēn)離(lí)科學。UPLC具有超低擴散體(tǐ)積（小(xiǎo)于15μL）可将亞2 μm色譜柱性能發揮到極緻。色譜工(gōng)作者使用UPLC結合小(xiǎo)顆粒色譜柱可以獲得更好的分(fēn)離(lí)度，靈敏度，更快的分(fēn)析速度。

ACQUITY UPLC的主要研究及開(kāi)發人員(yuán)與所獲得的2005 R&D 100獎牌合影。

2004年沃特世推出的UPLC推動了整個分(fēn)析儀器行業的發展。在之前的四十餘年中(zhōng)，沃特世緻力于以技術的發展提高儀器性能，而随着UPLC系列問世，我(wǒ)們則更關注儀器的實際應用，如何在各行各業的實驗室中(zhōng)發揮最高性能，幫助用戶克服試驗中(zhōng)遇到的挑戰。因此，陸續推出了ACQUITY UPLC H-Class、ACQUITY UPLC I-Class、PATROL UPLC過程分(fēn)析儀、ACQUITY UPC²、ACQUITY APC、ACQUITY UPLC M-Class以及ACQUITY QDa。

ACQUITY UPLC I-Class系統可實現最準确、重現性最好的分(fēn)離(lí)效果，可爲用戶成功分(fēn)析有限的或存在與複雜(zá)基質中(zhōng)的化合物(wù)，并且擁有更快的分(fēn)析速度。

ACQUITY UPLC H-Class系統具有四元溶劑混合靈活性和簡易性，擁有UPLC 高分(fēn)離(lí)、靈敏度和高通量等先進性能。該系統可幫助用戶在面向未來的LC平台上繼續運行現有的HPLC方法，并實現向UPLC分(fēn)離(lí)的無縫轉換。

ACQUITY APC超高效聚合物(wù)色譜系統可幫助用戶解決GPC/SEC分(fēn)辨率低，分(fēn)離(lí)時間長及溶劑消耗量大(dà)的問題。該系統基于體(tǐ)積排阻色譜分(fēn)離(lí)基本原理，以前所未有的分(fēn)析速度爲您提供更詳盡的聚合物(wù)材料信息。

ACQUITY UPLC M-Class系統用于納升級至微升級UPLC分(fēn)離(lí)，具有極佳的穩定性和可靠性。該系統的使用範圍非常廣，能夠幫助用戶應對樣品量極爲有限或者非常珍貴的樣品分(fēn)析。

PATROL UPLC過程分(fēn)析儀是一(yī)套實時過程分(fēn)析技術系統，能夠在生(shēng)産車(chē)間直接檢測和定量分(fēn)析複雜(zá)的多組分(fēn)樣品和成品。該系統可以幫助用戶估量關鍵質量屬性（CQA），将UPLC技術和質量源于設計（QbD）原則應用于過程開(kāi)發實驗室中(zhōng)。

ACQUITY UPC²超高效合相色譜系統是沃特世公司基于用戶需求不斷創新的有力體(tǐ)現，作爲分(fēn)離(lí)科學的一(yī)個新類别，拓寬了LC和GC分(fēn)離(lí)技術的領域。該系統可用以分(fēn)離(lí)，檢測并定量結構類似物(wù)、同分(fēn)異構體(tǐ)、對映異構體(tǐ)和非對映異構體(tǐ)混合物(wù)，幫助科研人員(yuán)解決這些分(fēn)離(lí)難題。值得一(yī)提的是CO2作爲UPC²主要的流動相，極大(dà)的降低了有機溶劑的使用，使得您的實驗室更加綠色環保。

二維ACQUITY UPLC系統具有捕集、平行柱再生(shēng)、中(zhōng)心切割、柱頭稀釋、時間耦合色譜、全二維色譜功能，可以減少多餘幹擾，增加峰容量和分(fēn)離(lí)度用于複雜(zá)樣品表征。

ACQUITY QDa質譜檢測器是一(yī)款專爲分(fēn)析人員(yuán)的需求而特别開(kāi)發的質譜檢測器。它耐用、可靠，無需預先對樣品進行任何調諧，能與您現有的LC、ACQUITY UPLC、ACQUITY UPC²和純化系統完美結合。其簡單直觀的操作可以最大(dà)程度降低意外(wài)共流出無或成分(fēn)所帶來的風險，提升日常分(fēn)析的質量和效率。

從第一(yī)台液相色譜儀器問世到現在52年的時間裏，液相色譜技術經曆了高壓液相色譜時代，高效液相色譜時代以及我(wǒ)們正在經曆的超高效液相色譜時代。沃特世公司以開(kāi)創了三個偉大(dà)時代，引領色譜技術發展而驕傲。我(wǒ)們也在不斷反思，用戶到底需要什麽樣的色譜分(fēn)離(lí)系統？

本次我(wǒ)們和大(dà)家簡單聊了聊液相色譜的發展史，之後我(wǒ)們将陸續從技術和應用角度分(fēn)享液相色譜的知(zhī)識，幫助大(dà)家用好液相分(fēn)離(lí)這項強大(dà)技術。